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附錄B,規(guī)范性附錄、脊髓灰質炎病毒滅活試驗B,1 試驗原理,將規(guī)定感染滴度的脊髓灰質炎病毒懸液以一定比例與酸性電解水混合。作用至規(guī)定的時間后加入中和劑.終止酸性電解水的滅活作用 接種細胞,進行殘留病毒感染滴度測定。然后與陽性對照組的病毒感染滴度進行比較,以確定其對病毒的滅活效果,B。2,滅活試驗方法、脊髓灰質炎病毒 型疫苗株 懸液的制備按,消毒技術規(guī)范,2002年版,進行,B,3,脊髓灰質炎病毒滅活試驗操作步驟B 3。1,取脊髓灰質炎病毒液0 05mL加到無菌試管中,再加入0,05mL有機干擾物 然后加入4。9mL酸性電解水、混勻、于20.水域中作用至規(guī)定時間 B 3。2,取0,1mL病毒與酸性電解水混合液 加入到含0,9mL中和劑的試管中。振打混合后 取樣按.消毒技術規(guī)范.2002年版。2,1、1。10 4所示方法檢測殘留脊髓灰質炎病毒滴度,B,3.3。陽性對照,用細胞維持液代替酸性電解水。其余步驟與試驗組相同。B,3、4、陰性對照,用不含脊髓灰質炎病毒的完全培養(yǎng)基作為陰性對照,以觀察培養(yǎng)基無污染、細胞是否生長良好.B,3.5.試驗重復3次、B。3 6、根據(jù)各組的平均病毒感染滴度 TCID50 分別計算其對病毒的滅活對數(shù)值.B 4,評價規(guī)定。對脊髓灰質炎病毒、在3次試驗中。陽性對照組病毒對數(shù)值為5,7。滅活對數(shù)值,4 00。判為消毒合格、B、5。注意事項B,5,1.對有機干擾物的要求與A.2、5。2相同、B,5,2,在病毒滅活試驗中。每次均應設置陽性對照.B 5.3,脊髓灰質炎病毒滅活試驗操作應在生物安全.級以上實驗室內進行。避免造成操作人員實驗室感染和對環(huán)境污染,B。5.4,操作人員應具有基本的病毒學實驗工作經驗。量使用移液器與無菌一次性吸頭,

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