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E。8。懸浮微生物的檢測E,8.1、懸浮微生物的采樣裝置有以下兩類,1。采用無源采樣裝置,如培養(yǎng)皿。2。采用有源采樣裝置 如撞擊采樣器.離心采樣器,過濾采樣器，E。8。2,空氣潔凈環(huán)境中懸浮微生物的靜態(tài)或空態(tài)檢測前、應(yīng)對各類表面進(jìn)行擦拭消毒。但不得對室內(nèi)空氣進(jìn)行熏蒸、噴灑之類的消毒.動(dòng)態(tài)檢測均不得對表面和空氣進(jìn)行消毒。E.8 3 沉降菌檢測應(yīng)符合下列要求、1 使用直徑90mm.Φ90,的培養(yǎng)皿采樣。當(dāng)采用其他直徑培養(yǎng)皿時(shí)、應(yīng)使其總面積和Φ90皿總面積相當(dāng).2，培養(yǎng)皿中灌注胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基。必須留樣作陰性對照,3.培養(yǎng)皿表面應(yīng)經(jīng)適當(dāng)消毒清潔處理后，布置在有代表性的地點(diǎn)和氣流擾動(dòng)極小的地點(diǎn)，在亂流潔凈室內(nèi)培養(yǎng)皿不應(yīng)布置在送風(fēng)口正下方 4。當(dāng)用戶沒有特定要求時(shí)。培養(yǎng)皿應(yīng)布置在地面及其以上0 8m之內(nèi)的任意高度,5,每一間潔凈室或每一個(gè)控制區(qū)應(yīng)設(shè)1個(gè)陰性對照皿、6 動(dòng)態(tài)監(jiān)測時(shí)也可協(xié)商布點(diǎn)位置和高度 7、培養(yǎng)皿數(shù)應(yīng)不少于微粒計(jì)數(shù)濃度的測點(diǎn)數(shù)、如工藝無特殊要求應(yīng)大于等于表E 8,3中的最少培養(yǎng)皿數(shù)、另外各加1個(gè)對照皿,8、當(dāng)延長沉降時(shí)間時(shí),可按比例減少最少培養(yǎng)皿數(shù),為防止脫水.最長沉降時(shí)間不宜超過1h,當(dāng)所需沉降時(shí)間超過1h.可重疊多皿連續(xù)采樣,除非經(jīng)過驗(yàn)證。證明更長的沉降時(shí)間可以基本按比例增加菌落數(shù)、9,培養(yǎng)皿應(yīng)從內(nèi)向外布置 從外向內(nèi)收皿.10。每布置完1個(gè)皿。皿蓋只允許斜放在皿邊上 對照皿蓋挪開即蓋上，11、布皿前和收皿后、均應(yīng)用雙層包裝保護(hù)培養(yǎng)皿.以防污染 12 收皿后皿應(yīng)倒置擺放.并應(yīng)及時(shí)放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)、在培養(yǎng)箱外時(shí)間不宜超過2h。如無專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定.對于檢測細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)溫度采用,35 37。培養(yǎng)時(shí)間為、24,48。h,對于檢測真菌.培養(yǎng)溫度、27,29,培養(yǎng)時(shí)間3d 13，布皿和收皿的檢測人員必須穿無菌服、但不得穿大褂、頭,手均不得裸露，褲管應(yīng)塞在襪套內(nèi)、并不得穿拖鞋,14.對培養(yǎng)后的皿上菌落計(jì)數(shù)時(shí).應(yīng)采用5.10倍放大鏡查看 若有2個(gè)或更多的菌落重疊，可分辨時(shí)則以2個(gè)或多個(gè)菌落計(jì)數(shù),15。當(dāng)單皿菌落數(shù)太大受到質(zhì)疑時(shí)，可按以下原則之一進(jìn)行處理、1,作為壞點(diǎn)剔除,2，重測、如結(jié)果仍大,以兩次平均值為準(zhǔn),如結(jié)果很小.可再重測。3,重測該處微粒濃度,參考此結(jié)果作出判斷,所有上述處理方法均應(yīng)記錄在案.16，每皿平均菌落數(shù)取到小數(shù)點(diǎn)后1位、17.動(dòng)態(tài)監(jiān)測時(shí)每點(diǎn)疊放多個(gè)平皿或采用可自動(dòng)切換的儀器 每點(diǎn)應(yīng)采滿4h以上，每皿可采30min、當(dāng)只放1個(gè)皿時(shí)，可少于4h、但不可少于1h,E、8,4 浮游菌采樣應(yīng)符合下列要求,1,使用單級或多級撞擊式采樣器.離心采樣器或過濾采樣器，采樣必須按所用儀器說明書的步驟進(jìn)行 特別要注意檢測之前對儀器消毒火菌 并對培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做陰性對照.2 采樣點(diǎn)數(shù)應(yīng)不少于微粒計(jì)數(shù)濃度測點(diǎn)數(shù)、3。采樣點(diǎn)應(yīng)在離地0，8m高平面上均勻布置.或經(jīng)委托方.用戶。與檢測方協(xié)商確定、亂流潔凈室內(nèi)不得在送風(fēng)口正下方布點(diǎn)，靜態(tài)或空態(tài)檢測前對室內(nèi)各種表面應(yīng)作擦拭消毒。4.每點(diǎn)采樣1次,如工藝無特殊要求，每次采樣量應(yīng)大于等于表E、8，4推薦的浮游菌最小采樣量,每次采樣時(shí)間不宜超過15min、不應(yīng)超過30min,當(dāng)潔凈度很高,或預(yù)期含菌濃度可能很低時(shí) 采樣量應(yīng)大于最小采樣量很多。以滿足減少計(jì)數(shù)誤差的要求、5.采樣器應(yīng)用支架固定、采樣時(shí)檢測人員應(yīng)退出。手持離心式采樣器除外,檢測人員的穿戴同本附錄E.8、3條第15款,必須手持采樣器時(shí)，應(yīng)將手臂伸直,站于下風(fēng)向，6。采樣后宜在2h之內(nèi)將采樣器中的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條送入培養(yǎng)箱中培養(yǎng).7。每點(diǎn)平均值取到小數(shù)點(diǎn)后1位 8,動(dòng)態(tài)監(jiān)測的測點(diǎn)位置，數(shù)量和高度由工藝并經(jīng)協(xié)商確定,每間潔凈室或每一個(gè)獨(dú)立受控環(huán)境中各點(diǎn)總采樣量，不分級別。均應(yīng)大于1m3 每點(diǎn)可用多臺采樣器,9.單點(diǎn)菌落數(shù)太大時(shí).應(yīng)按附錄E、8、3條第15款的原則處理,E.8 5、表面染菌密度檢測應(yīng)符合下列要求，1 對于潔凈室內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu) 設(shè)備等表面的微生物采樣。應(yīng)采用無菌棉拭子擦抹法,當(dāng)表面很大,硬且平時(shí).也可采用接觸皿法,2，用規(guī)格板標(biāo)定出面積為25cm2的區(qū)塊,對于圍護(hù)結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)不少于4塊、對于設(shè)備 每件不少于2塊。取樣地點(diǎn)均協(xié)商確定,3 將無菌棉拭于含10mL稀釋液試管中浸濕、于管壁上擠干后.對一區(qū)塊擦抹采樣.橫豎往返8次,每一區(qū)塊使用1根無菌棉拭，采樣后 以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管中、經(jīng)電動(dòng)混勻器震蕩20s或在手掌振打200次、4。取含菌液體1、0mL,以瓊脂灌注法接種平皿,每個(gè)樣本接種2個(gè)平皿.于。35，37,培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24、48.h后計(jì)數(shù)，5。必須將本次檢測所用的稀釋液。棉拭子,培養(yǎng)基等留樣作陰性比照、6，具體事項(xiàng)遵照衛(wèi)生部。消毒技術(shù)規(guī)范.執(zhí)行。7、對于適用接觸皿采樣的表面。以無菌操作方式。先將培養(yǎng)基注入硬質(zhì)或軟質(zhì)Φ55平皿，使培養(yǎng)基表面高出培養(yǎng)皿周邊，測試時(shí) 將培養(yǎng)皿倒過來 使培養(yǎng)基表面均勻牢固地按壓住整個(gè)區(qū)域5s.不得有環(huán)形或線性的運(yùn)動(dòng),8、對于圍護(hù)結(jié)構(gòu)，每面結(jié)構(gòu)應(yīng)用不少于4個(gè)培養(yǎng)皿按壓.對于設(shè)備。每件用不少于2個(gè)培養(yǎng)皿按壓。9 按壓取樣后的培養(yǎng)皿，應(yīng)在2h之內(nèi),于.35，37。培養(yǎng)箱中培養(yǎng).24，48.h后計(jì)數(shù)。10.菌數(shù)平均數(shù)取到小數(shù)點(diǎn)后1位、