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附錄F,潔凈室生物學(xué)評(píng)價(jià)方法F，1,回。排風(fēng)高效過濾風(fēng)口微生物透過率F。1、1.儀器設(shè)備和材料應(yīng)符合以下要求。1、儀器設(shè)備，Φ90玻璃平皿,或塑料平皿 空氣微生物采樣器、固體撞擊式采樣器 離心式采樣器。液體沖擊式采樣器等均可使用.常用的為安德遜,Andersen，采樣器.隸屬于固體撞擊式采樣器、微生物氣溶膠發(fā)生器 由氣泵，油水分離器，流量計(jì) 高效過濾器 噴霧器，緩沖瓶等組成,各種玻璃移液管，吸管，試管。容器瓶等、計(jì)時(shí)器。如秒表,恒溫培養(yǎng)箱。潔凈工作臺(tái)，高壓蒸汽消毒鍋、2。材料,胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基,生理鹽水 75、酒精 菌種 宜選用毒性小或沒有毒性,且便于區(qū)別大氣雜菌的特定菌種。常用的有枯草芽孢桿菌。黏質(zhì)沙雷氏菌、大腸噬菌體等，采樣介質(zhì)可選用硅酮類 石油胨類.醇類,糖類.纖維素類，蛋白類.混合類.組織培養(yǎng)液等、套筒 測(cè)定回。排風(fēng)高效過濾風(fēng)口時(shí)需要使用，罩住整個(gè)入口 使檢漏范圍包括邊框.長度應(yīng)使通過氣流時(shí)間為0,5s 1s，見圖F.1、1 F.1.2，透過率應(yīng)按以下方法評(píng)價(jià)，在回 排風(fēng)高效過濾風(fēng)口進(jìn)風(fēng)端加設(shè)套筒，在套筒口部發(fā)生微生物氣溶膠、在過濾器出風(fēng)面用浮游菌法采樣 由回 排風(fēng)高效過濾風(fēng)口前后的微生物氣溶膠濃度可計(jì)算得出微生物透過率，F(xiàn)，1、3.檢測(cè)步驟應(yīng)符合下列要求.1.制定方案，明確評(píng)價(jià)任務(wù)、制定詳細(xì)的評(píng)價(jià)方案。包括確定微生物氣溶膠。發(fā)生器所需的菌液濃度 潔凈壓縮空氣流量，確定在回.排風(fēng)高效過濾風(fēng)口出風(fēng)端的微生物采樣周期.采樣次數(shù)等、一般可根據(jù)回,排風(fēng)高效過濾風(fēng)口的塵埃顆粒物過濾效率進(jìn)行計(jì)算、2。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備。根據(jù)預(yù)先制定的評(píng)價(jià)方案.準(zhǔn)備所需材料 儀器設(shè)備，制作采樣培養(yǎng)皿.一般而言，采樣細(xì)菌用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。采集真菌用沙氏或真菌選擇培養(yǎng)基。采樣病毒用根據(jù)病毒特性配制的采樣介質(zhì) 3.發(fā)生微生物氣溶膠。將培育好的高濃度微生物溶液,一般為。108.1010.cfu.mL，利用生理鹽水按10倍稀釋法逐次稀釋至需要的低濃度.步驟1確定的濃度，然后由移液管、吸管量取一定容積的低濃度微生物溶液至氣溶膠發(fā)生裝置的溶液瓶。由微生物氣溶膠發(fā)生器在回 排風(fēng)高效過濾風(fēng)口的進(jìn)風(fēng)端將微生物溶液霧化發(fā)生微生物氣溶膠、4。采樣。對(duì)于回。排風(fēng)高效過濾風(fēng)口 可在其后的出風(fēng)管道中采樣.離排風(fēng)高效過濾風(fēng)門的距離根據(jù)實(shí)際工程而定 原則上出風(fēng)后有所混合 能近則好、采樣點(diǎn)沿風(fēng)管寬度方向均勻布置3點(diǎn)。采樣周期。采樣次數(shù)按預(yù)先制定的評(píng)價(jià)方案執(zhí)行,采樣過程中.不能中斷微生物氣溶膠的發(fā)生，采樣結(jié)束后才能停止發(fā)生微生物氣溶膠,此后噴霧器中必須尚存不少于一半的微生物溶液,且需對(duì)剩余菌液活性進(jìn)行涂布法驗(yàn)證 以修正菌液濃度。5，培養(yǎng)，將采好的平皿立即蓋上蓋、細(xì)菌類在 35，37。培養(yǎng),1，2、d 結(jié)核菌培養(yǎng)3周。真菌在28,培養(yǎng)3d.上述培養(yǎng)時(shí)間可根據(jù)所采樣微生物特性而適當(dāng)調(diào)整,培養(yǎng)的過程中應(yīng)定期觀察培養(yǎng)箱內(nèi)菌落的生長情況 避免培養(yǎng)箱內(nèi)干燥菌落不生長或培養(yǎng)皿內(nèi)菌落過多充分生長匯合等情況的發(fā)生。6 計(jì)數(shù)、可以目測(cè)。電子顯微鏡。菌落計(jì)數(shù)器等對(duì)采集到且培養(yǎng)好的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù).當(dāng)采到的菌落很多時(shí)、在它們未生長匯合前。用顯微鏡及早觀察,將平皿劃成許多相等的部分抽出一部分?jǐn)?shù)菌、然后乘以所劃份數(shù) 即可得出每皿總菌數(shù)、計(jì)數(shù)完畢后,可根據(jù)式,F。1.3。1、計(jì)算濃度,8，消毒滅菌、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后。需對(duì)剩余菌液以及所用各種儀器 設(shè)備、平皿等進(jìn)行消毒滅菌,酒精擦洗處理。F.1、4,在進(jìn)行潔凈室生物學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)符合以下要求.1.正式試驗(yàn)前、應(yīng)進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)。并對(duì)各種儀器進(jìn)行調(diào)試和標(biāo)定,2，應(yīng)進(jìn)行陽性對(duì)照試驗(yàn)，3，應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)、4、應(yīng)在陽性試驗(yàn)中長菌、陰性試驗(yàn)組不長菌.5。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù).實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)做好各種儀器,設(shè)備.衣物等的消毒滅菌處理，6,試驗(yàn)結(jié)束后。需對(duì)微生物氣溶膠發(fā)生器內(nèi)的剩余菌液活性進(jìn)行涂布法驗(yàn)證.修正式，F(xiàn) 1，3，3、中的菌液濃度。7 采樣周期應(yīng)設(shè)計(jì)合理,當(dāng)確定采樣周期存在一定困難時(shí) 宜增加采樣次數(shù),每次采樣使用不同的采樣周期